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醫療機構水污染物排放標準
2017.09.15
為貫徹《中華人民共和國環境?;しā?、《中華人民共和國水污染防治法》、《中華人民共和國海洋環境?;しā?、《中華人民共和國大氣污染防治法》、《中華人民共和國傳染病防治法》,加強對醫療機構污水、污水處理站廢氣、污泥排放的控制和管理,預防和控制傳染病的發生和流行,保障人體健康,維護良好的生態環境,制定本標準。
   本標準規定了醫療機構污水及污水處理站產生的廢氣和污泥的污染物控制項目及其排放限值、處理工藝與消毒要求、取樣與監測和標準的實施與監督等。
   本標準自實施之日起,代替GB8978-1996《污水綜合排放標準》中有關醫療機構水污染物排放標準部分,并取代GB18466-2001《醫療機構污水排放要求》。新、擴、改醫療機構自本標準實施之日起按本標準實施管理,現有醫療機構在2007年12月31日前達到本標準要求。
    本標準的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D、附錄E和附錄F為規范性附錄。
本標準為首次發布。
    本標準由國家環境?;ぷ芫摯萍急曜妓咎岢霾⒐榭?。
本標準委托北京市環境?;た蒲а芯吭漢橢泄膊≡し攬刂浦行鈉鴆?。
本標準由國家環境?;ぷ芫?005年07月27日批準。
本標準由國家環境?;ぷ芫指涸鸞饈?。


醫療機構水污染物排放標準

1范圍

本標準規定了醫療機構污水、污水處理站產生的廢氣、污泥的污染物控制項目及其排放和控制限值、處理工藝和消毒要求、取樣與監測和標準的實施與監督。
本標準適用于醫療機構污水、污水處理站產生污泥及廢氣排放的控制,醫療機構建設項目的環境影響評價、環境?;ど枋┥杓?、竣工驗收及驗收后的排放管理。當醫療機構的辦公區、非醫療生活區等污水與病區污水合流收集時,其綜合污水排放均執行本標準。建有分流污水收集系統的醫療機構,其非病區生活區污水排放執行GB8978的相關規定。

2規范性引用文件

下列標準和本標準表5、表6所列分析方法標準及規范所含條文在本標準中被引用即構成為本標準的條文,與本標準同效。當上述標準和規范被修訂時,應使用其最新版本。
GB8978  污水綜合排放標準
GB3838  地表水環境質量標準
GB3097  海水水質標準
GB16297  大氣污染物綜合排放標準
HJ/T55   大氣污染物無組織排放監測技術導則
HJ/T91   地表水和污水檢測技術規范

3術語和定義

   本標準采用下列定義。
3.1醫療機構 medical organization
指從事疾病診斷、治療活動的醫院、衛生院、療養院、門診部、診所、衛生急救站等。
3.2醫療機構污水 medical organization wastewater
指醫療機構門診、病房、手術室、各類檢驗室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平間等處排出的診療、生活及糞便污水。當醫療機構其他污水與上述污水混合排出時一律視為醫療機構污水。
3.3污泥 sludge
指醫療機構污水處理過程中產生的柵渣、沉淀污泥和化糞池污泥。
3.4廢氣 waste gas
指醫療機構污水處理過程中產生的有害氣體。

4技術內容

4.1污水排放要求

4.1.1傳染病和結核病醫療機構污水排放執行表1的規定。
4.1.2縣級及縣級以上或20張床位及以上的綜合醫療機構和其他醫療機構污水排放執行表2的規定。直接或間接排入地表水體和海域的污水執行排放標準,排入終端已建有正常運行城鎮二級污水處理廠的下水道的污水,執行預處理標準。
4.1.3縣級以下或20張床位以下的綜合醫療機構和其他所有醫療機構污水經消毒處理后方可排放。
4.1.4禁止向GB3838I、II類水域和III類水域的飲用水?;で陀斡廄?,GB3097一、二類海域直接排放醫療機構污水。
4.1.5帶傳染病房的綜合醫療機構,應將傳染病房污水與非傳染病房污水分開。傳染病房的污水、糞便經過消毒后方可與其他污水合并處理。
4.1.6采用含氯消毒劑進行消毒的醫療機構污水,若直接排入地表水體和海域,應進行脫氯處理,使總余氯小于0.5mg/L。
表1 傳染病、結核病醫療機構水污染物排放限值(日均值)
序號 控制項目 標準值
1 糞大腸菌群數(MPN/L) 100
2 腸道致病菌 不得檢出
3 腸道病毒 不得檢出
4 結核桿菌 不得檢出
5 PH 6-9
6 化學需氧量(COD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
60
60
7 生化需氧量(BOD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
8 懸浮物(SS)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
9 氨氮(mg/L) 15
10 動植物油(mg/L) 5
11 石油類(mg/L) 5
12 陰離子表面活性劑(mg/L) 5
13 色度(稀釋倍數) 30
14 揮發酚(mg/L) 0.5
15 總氰化物(mg/L) 0.5
16 總汞(mg/L) 0.05
17 總鎘(mg/L) 0.1
18 總鉻(mg/L) 1.5
19 六價鉻(mg/L) 0.5
20 總砷(mg/L) 0.5
21 總鉛(mg/L) 1.0
22 總銀(mg/L) 0.5
23 總A(Bq/L) 1
24 總B(Bq/L) 10
25 總余氯1)2(mg/L)
(直接排入水體的要求)
0.5
注:1)采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為: 消毒接觸池的接觸時間≥1.5h,
接觸池出口總余氯6.5-10 mg/L。
    2)采用其他消毒劑對總余氯不作要求。
 
表2 綜合醫療機構和其他醫療機構水污染物排放限值(日均值)
序號 控制項目 排放標準 預處理標準
1 糞大腸菌群數(MPN/L) 500 5000
2 腸道致病菌 不得檢出 -
3 腸道病毒 不得檢出 -
4 pH 6-9 6-9
5 化學需氧量(COD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
60
60
 
250
250
6 生化需氧量(BOD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
 
100
100
7 懸浮物(SS)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
 
60
60
8 氨氮(mg/L) 15 -
9 動植物油(mg/L) 5 20
10 石油類(mg/L) 5 20
11 陰離子表面活性劑(mg/L) 5 10
12 色度(稀釋倍數) 30 -
13 揮發酚(mg/L) 0.5 1.0
14 總氰化物(mg/L) 0.5 0.5
15 總汞(mg/L) 0.05 0.05
16 總鎘(mg/L) 0.1 0.1
17 總鉻(mg/L) 1.5 1.5
18 六價鉻(mg/L) 0.5 0.5
19 總砷(mg/L) 0.5 0.5
20 總鉛(mg/L) 1.0 1.0
21 總銀(mg/L) 0.5 0.5
22 總A(Bq/L) 1 1
23 總B(Bq/L) 10 10
24 總余氯1)2)(mg/L) 0.5 -
注:1)采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為:
一級標準:消毒接觸池接觸時間≥1h,接觸池出口總余氯3-10 mg/L。
        二級標準:消毒接觸池接觸時間≥1h,接觸池出口總余氯2-8 mg/L。
     2)采用其他消毒劑對總余氯不作要求。

4.2廢氣排放要求

4.2.1污水處理站排出的廢氣應進行除臭除味處理,保證污水處理站周邊空氣中污染物達到表3要求。
4.2.2傳染病和結核病醫療機構應對污水處理站排出的廢氣進行消毒處理。
表3 污水處理站周邊大氣污染物最高允許濃度                                          
序號 控制項目 標準值
1 氨(mg/m3 1.0
2 硫化氫(mg/m3 0.03
3 臭氣濃度(無量綱) 10
4 氯氣(mg/m3 0.1
5 甲烷(指處理站內最高體積百分數 %) 1%

4.3污泥控制與處置

4.3.1柵渣、化糞池和污水處理站污泥屬危險廢物,應按危險廢物進行處理和處置。
4.3.2污泥清淘前應進行監測,達到表4要求。
表4 醫療機構污泥控制標準
醫療機構類別 糞大腸菌群數
(MPN/g)
腸道致病菌 腸道病毒 結核桿菌 蛔蟲卵死亡率(%)
傳染病醫療機構 ≤100 不得檢出 不得檢出 - >95
結核病醫療機構 ≤100 - - 不得檢出 >95
綜合醫療機構和其它醫療機構 ≤100 - - - >95

5處理工藝與消毒要求

5.1醫療機構病區和非病區的污水,傳染病區和非傳染病區的污水應分流,不得將固體傳染性廢物、各種化學廢液棄置和傾倒排入下水道。
5.2傳染病醫療機構和綜合醫療機構的傳染病房應設專用化糞池,收集經消毒處理后的糞便排泄物等傳染性廢物。
5.3化糞池應按最高日排水量設計,停留時間為24-36h。清掏周期為180-360d。
5.4醫療機構的各種特殊排水應單獨收集并進行處理后,再排入醫院污水處理系統。
5.4.1低放射性廢水應經衰變池處理。
5.4.2洗相室廢液應回收銀,并對廢液進行處理。
5.4.3口腔科含汞廢水應進行除汞處理。
5.4.4檢驗室廢水應根據使用化學品的性質單獨收集,單獨處理。
5.4.5含油廢水應設置隔油池處理。
5.5傳染病醫療機構和結核病醫療機構污水處理宜采用二級處理+消毒工藝或深度處理+消毒工藝。
5.6綜合醫療機構污水排放執行排放標準時,宜采用二級處理+消毒工藝或深度處理+消毒工藝;執行預處理標準時宜采用一級處理或一級強化處理+消毒工藝。
5.7消毒劑應根據技術經濟分析選用,通常使用的有:二氧化氯、次氯酸鈉、液氯、紫外線和臭氧等。采用含氯消毒劑時按表1、表2要求設計。
5.7.1采用紫外線消毒,污水懸浮物濃度應小于10 mg/L,照射劑量30-40mJ/cm2,照射接觸時間應大于10s或由試驗確定。
5.7.2采用臭氧消毒,污水懸浮物濃度應小于20 mg/L,臭氧用量應大于10mg/L,接觸時間應大于12min或由試驗確定。

6取樣與監測

6.1污水取樣與監測

6.1.1應按規定設置科室處理設施排出口和單位污水外排口,并設置排放口標志。
6.1.2表1第16-22項,表2第15-21項在科室處理設施排出口取樣,總A、總B在衰變池出口取樣監測。其它污染物的采樣點一律設在排污單位的外排口。
6.1.2醫療機構污水外排口處應設污水計量裝置,并宜設污水比例采樣器和在線監測設備。
6.1.3 監測頻率
6.1.3.1糞大腸菌群數每月監測不得少于1次。采用含氯消毒劑消毒時,接觸池出口總余氯每日監測不得少于2次(采用間歇式消毒處理的,每次排放前監測)。
6.1.3.2腸道致病菌主要監測沙門氏菌、志賀氏菌。沙門氏菌的監測,每季度不少于1次;志賀氏菌的監測,每年不少于2次。其他致病菌和腸道病毒按6.1.3.3規定進行監測。結核病醫療機構根據需要監測結核桿菌。
6.1.3.3收治了傳染病病人的醫院應加強對腸道致病菌和腸道病毒的監測。同時收治的感染上同一種腸道致病菌或腸道病毒的甲類傳染病病人數超過5人、或乙類傳染病病人數超過10人、或丙類傳染病病人數超過20人時,應及時監測該種傳染病病原體。
6.1.3.4理化指標監測頻率:pH 每日監測不少于2次,COD和SS每周監測1次,其他污染物每季度監測不少于1次。
6.1.3.5 采樣頻率:每4小時采樣1次,一日至少采樣3次,測定結果以日均值計。
6.1.4監督性監測按HJ/T91執行。
6.1.5監測分析方法按表5和附錄。
6.1.6污染物單位排放負荷計算見附錄F。
表5 水污染物監測分析方法
序號 控制項目 測  定  方  法 測定下限(mg/L) 方法來源
1 糞大腸菌群數 多管發酵法   附錄A
2 沙門氏菌     附錄B
3 志賀氏菌     附錄C
4 結核桿菌     附錄E
5 總余氯 N,N-二乙基-1,4-苯二胺分光光度法
N,N-二乙基-1,4-苯二胺滴定法
  GB11898
GB11897
6 化學需氧量(COD) 重鉻酸鹽法 30 GB11914
7 生化需氧量(BOD) 稀釋與接種法 2 GB7488
8 懸浮物(SS) 重量法   GB11901
9 氨氮 蒸餾和滴定法
比色法
0.2
0.05
GB7478 GB7479
10 動植物油 紅外光度法 0.1 GB/T16488
11 石油類 紅外光度法 0.1 GB/T16488
12 陰離子表面活性劑 亞甲藍分光光度法 0.05 GB7494
13 色 度 稀釋倍數法   GB11903
14 pH值 玻璃電極法   GB6920
15 總 汞 冷吸收分光光度法
雙硫腙分光光度法
0.0001
0.002
GB7468
GB7469
16 揮發酚 蒸餾后4-氨基安替比林分光光度法 0.002 GB7490
17 總氰化物 硝酸銀滴定法
異煙酸-吡唑啉酮比色法
吡啶-巴比妥酸比色法
0.25
0.004
0.002
GB7486
GB7486
GB7486
18 總 鎘 原子吸收分光光度法(螯合萃取法)
雙硫腙分光光度法
0.001
0.001
GB7475
GB7471
19 總 鉻 高錳酸鉀氧化-二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7466
20 六價鉻 二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7467
21 總 砷 二乙基二硫代氨基甲酸銀分光光度法 0.007 GB7485
22 總 鉛 原子吸收分光光度法(螯合萃取法)
雙硫腙分光光度法
0.01
0.01
GB7475
GB7470
23 總 銀 火焰原子吸收分光光度法
鎘試劑2B分光光度法
0.03
0.01
GB119079              GB11908
24 總A 厚源法 0.05Bq/L EJ/T1075
25 總B 蒸發法   EJ/T900

                                                                                                                                                             

6.2大氣取樣與監測

6.2.1污水處理站大氣監測點的布置方法與采樣方法按GB16297中附錄C和HJ/T55的有關規定執行。
6.2.2采樣頻率,每2h采樣一次,共采集4次,取其最大測定值。每季度監測一次。
6.2.3監測分析方法按表6。
表6 大氣污染物監測分析方法
序號 控制項目 測定方法 方法來源
1 次氯酸鈉-水楊酸分光光度法 GB/T14679
2 硫化氫 氣相色譜法 GB/T14678
3 臭氣濃度(無量綱) 三點比較式臭袋法 GB/T14675
4 氯氣 甲基橙分光光度法 HJ/T30
5 甲烷 氣相色譜法 CJ/3037

6.3污泥取樣與監測

6.3.1取樣方法,采用多點取樣,樣品應有代表性,樣品重量不小于1kg。清掏前監測。                                                                                                                                                                                                                                                                                                 
6.3.2監測分析方法見附錄A、附錄B、附錄C、附錄D和附錄E。

7標準的實施與監督

7.1本標準由縣級以上人民政府環境?;ば姓鞴懿棵鷗涸鵂嘍絞凳?。
7.2省、自治區、直轄市人民政府對執行本標準不能達到本地區環境功能要求時,可以根據總量控制要求和環境影響評價結果制定嚴于本標準的地方污染物排放標準。


附錄  A

(規范性附錄)
醫療機構污水和污泥中糞大腸菌群的檢驗方法
 
A1  儀器和設備
A1.1 高壓蒸汽滅菌器。
A1.2 干燥滅菌箱。
A1.3 培養箱:37℃。
A1.4 恒溫水浴箱。
A1.5 電爐。
A1.6 天平。
A1.7 滅菌平皿。
A1.8 滅菌刻度吸管。
A1.9 酒精燈
A2  培養基和試劑
A2.1 乳糖膽鹽培養液
A2.1.1成分
蛋白胨                         20g
豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         5g
乳糖                           5g
0.4%溴甲酚紫水溶液            2.5mL
蒸餾水                         1000mL
A2.1.2 制法
將蛋白胨、豬膽鹽及乳糖溶解于1000mL蒸餾水中,調整pH到7.4,加入指示劑,充分混勻,分裝于內有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。
A2.2 三倍濃度乳糖膽鹽培養液
A2.2.1成分
蛋白胨                         60g
豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         15g
乳糖                           15g
0.4%溴甲酚紫水溶液            7.5mL
蒸餾水                         1000mL
A2.2.2 制法
制法同附錄A2.1.2。
A2.3 伊紅美蘭培養基(EMB培養基)
A2.3.1 成分
蛋白胨                          10g
       乳糖                            10g
       磷酸氫二鉀                      2g   
       瓊脂                            20g
       2%伊紅水溶液                   20mL
       0.5%美藍水溶液                 13mL
       蒸餾水                          1000mL
A2.3.2 制法
將瓊脂加到900mL蒸餾水中,加熱溶解,然后加入磷酸氫二鉀和蛋白胨,混勻使溶解,再加入蒸餾水補足至1000mL,調整pH至7.2~7.4。趁熱用脫脂棉和砂布過濾,再加入乳糖,混勻,定量分裝于燒瓶內,115℃滅菌20min。作為儲備培養基貯存于冷暗處備用。
臨用時,加熱融化儲備培養基,待冷至60℃左右,根據燒瓶內培養基的容量,加入一定量的已滅菌的2%伊紅水溶液和0.5%美藍水溶液,充分搖勻(防止產生氣泡)。傾注平皿備用。
A2.4 乳糖蛋白胨培養液
A2.4.1成分
蛋白胨                         10g
牛肉膏                         3g
乳糖                           5g
氯化鈉                         5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液          1mL
蒸餾水                         1000mL
A2.4.2 制法
將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000mL蒸餾水中,調整pH到7.2~7.4,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混勻,分裝于內有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。
A2.5 革蘭氏染色液
A2.5.1 結晶紫染色液
結晶紫                         1g
95%乙醇溶液                   20mL
1%草酸銨水溶液                1000mL
將結晶紫溶于乙醇中,然后與草酸銨水溶液混合。
A2.5.2 革蘭氏碘液
碘                             1g
碘化鉀                         2g
蒸餾水                         300mL
將碘與碘化鉀混合,加入蒸餾水少許,充分搖勻,待完全溶解,再加入蒸餾水至300mL。
A2.5.3 脫色液
95%乙醇。
A2.5.4 沙黃復染液
沙黃                           1g
95%乙醇                       2g
蒸餾水                         90mL
將沙黃溶于95%乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。
A2.6 染色法
染色的基本步驟為:1)涂片:在載玻片上滴加一滴生理鹽水,用滅菌的接種環取菌落少許,與生理鹽水混勻,涂布成薄膜;2)干燥:在室溫中使自然干燥;3)固定:將涂片迅速通過火焰2~3次,以載玻片反面接觸皮膚,熱而不燙為度;4)染色:滴加結晶紫染色液,染色1min,水洗;5)媒染:滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗;6)脫色:滴加95%乙醇脫色,約30s,水洗;7)復染:滴加復染液,復染1min,水洗。
革蘭氏陽性菌染色后呈紫色,革蘭氏陰性菌染色后呈紅色。
注:亦可用1:10稀釋的石炭酸復紅染色液作復染劑,復染時間為10s。
A3  檢驗程序
A4  操作步驟
A4.1 樣品準備
A4.1.1 污水
污水樣品應至少取200mL,使用前應充分混勻。
根據預計的污水樣品中糞大腸菌群數確定污水樣品接種量。糞大腸菌群數量相對較少的接種量一般為10mL、1mL、0.1mL。糞大腸菌群數較多時接種量為1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。
接種量少于1mL時,水樣應制成稀釋樣品后供發酵試驗使用。接種量為0.1mL、0.01mL時,取稀釋比分別為1:10、1:100。其它接種量的稀釋比依此類推。
1:10稀釋樣品的制作方法為:吸取1mL水樣,注入到盛有9mL滅菌水的試管中,混勻,制成1:10稀釋樣品。因此,取1mL1:10稀釋樣品,等于取0.1mL污水樣品。其它稀釋比的稀釋樣品同法制作。
注1:若樣品為經過氯消毒的污水,應在采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。
A4.1.2 污泥
污泥樣品應至少取200g,使用前應充分混勻。
根據預計的污泥樣品中糞大腸菌群數量確定污泥樣品接種量。糞大腸菌群數量相對較少的污泥樣品接種量一般為0.1g、0.01g、0.001g。糞大腸菌群數量較多時接種量為0.01g、0.001g、0.0001g或0.001g、0.0001g、0.00001g等。
污泥樣品應制成稀釋樣品后供發酵試驗使用。接種量0.1g、0.01g、0.001g的稀釋樣品制作方法如下:取20g污泥樣品,加入到三角燒瓶中,加滅菌水使成200mL,混勻,制成1:10稀釋樣品。吸取1:10稀釋樣品1mL,注入到盛有9mL滅菌水的試管中,混勻,制成1:100稀釋樣品。按同法制成1:1000稀釋樣品。接種1mL1:10、1:100、1:1000稀釋樣品等于接種0.1g、0.01g、0.001g污泥樣品。
注1:若樣品為經過氯消毒的污泥,應在采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。
A4.2 發酵試驗
將樣品接種于裝有乳糖膽鹽培養液的試管(內有小倒管)中,44℃培養24h。樣品接種體積以及管內乳糖膽鹽培養液的濃度與體積根據以下條件確定:
樣品為污水時,取三個接種量、每個接種量的樣品分別接種于5個試管內,共需15個試管。試管內乳糖膽鹽培養液的濃度與體積應根據接種量確定。若接種量為10mL,吸取10mL樣品接種于裝有5mL三倍濃度乳糖膽鹽培養液的試管內;若接種量為1mL時,吸取1mL樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養液的試管內;若接種量少于1mL時,吸取1mL稀釋樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養液的試管內。
樣品為污泥時,取三個接種量、每個接種量的稀釋樣品分別接種于3個試管內,共需9個試管。9個試管中,各裝有10mL乳糖膽鹽培養液。各個試管接種稀釋樣品體積均為1mL。
A4.3 平板分離
大腸桿菌分解乳糖產酸時培養液變色、產氣時小倒管內出現氣泡。經24h培養后,將產酸的試管內培養液分別劃線接種于EMB培養基上。置于37℃培養箱中,培養18~24h。
A4.4 鑒定
挑選可疑糞大腸菌群菌落,進行革蘭氏染色和鏡檢??梢刪溆校?)深紫黑色,具有金屬光澤的菌落;2)紫黑色,不帶或略帶金屑光澤的菌落;3)淡紫紅色,中心色較深的菌落。
上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,則挑取上述典型菌落1~3個接種于盛有5mL乳糖蛋白胨培養液倒管和倒管的試管內,置于44℃培養箱中培養24h。產酸產氣試管為糞大腸菌群陽性管。
A5 計數
根據證實有糞大腸菌群存在的陽性管數,查表A1或A2可得100mL污水或1g污泥中糞大腸菌群MPN值。
由于表A1和表A2是按一定的三個10倍濃度差接種量設計的(污水接種量為10mL、1mL和0.1mL,污泥接種量為0.1g、0.01g和0.001g),當采用其他三個10倍濃度差接種量時,需要修正表內MPN值,具體方法如下:
表內所列污水(污泥)最大接種量增加10倍時表內MPN值相應降低10倍;污水(污泥)最大接種量減少10倍時表內MPN值相應增加10倍。如污水接種量改為1mL、0.1mL和0.01mL時,A1表內MPN值相應增加10倍。其它的三個10倍濃度差接種量的MPN值相應類推。
由于A1表內MPN值的單位為每100mL污水樣品中MPN值,而污水以1L為報告單位,因此需將查A1表得到的MPN值乘上10,換算成1L污水樣品中的MPN值。
 
表A1 污水中糞大腸菌群最可能數(MPN)檢索表
(污水樣品接種量為5份10mL水樣,5份1mL水樣和5份0.1mL水樣)
陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN  
接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣  
0 0 0 0 2 0 0 5 4 0 0 13  
0 0 1 2 2 0 1 7 4 0 1 17  
0 0 2 4 2 0 2 9 4 0 2 21  
0 0 3 5 2 0 3 12 4 0 3 25  
0 0 4 7 2 0 4 14 4 0 4 30  
0 0 5 9 2 0 5 16 4 0 5 36  
0 1 0 2 2 1 0 7 4 1 0 17  
0 1 1 4 2 1 1 9 4 1 1 21  
0 1 2 6 2 1 2 12 4 1 2 26  
0 1 3 7 2 1 3 14 1 1 3 31  
0 1 4 9 2 1 4 17 4 1 4 36  
0 1 5 11 2 1 5 19 4 1 5 42  
0 2 0 4 2 2 0 9 4 2 0 22  
0 2 1 6 2 2 1 12 4 2 1 26  
0 2 2 7 2 2 2 14 4 2 2 32  
0 2 3 9 2 2 3 17 4 2 3 38  
0 2 4 11 2 2 4 19 4 2 4 44  
0 2 5 13 2 2 5 22 4 2 5 50  
0 3 0 6 2 3 0 12 4 3 0 27  
0 3 1 7 2 3 1 14 4 3 1 33  
0 3 2 9 2 3 2 17 4 3 2 39  
0 3 3 11 2 3 3 20 4 3 3 45  
0 3 4 13 2 3 4 22 4 3 4 52  
0 3 5 15 2 3 5 25 4 3 5 59  
0 4 0 8 2 4 0 15 4 4 0 34  
0 4 1 9 2 4 1 17 4 4 1 40  
0 4 2 11 2 4 2 20 4 4 2 47  
0 4 3 13 2 4 3 23 4 4 3 54  
0 4 4 15 2 4 4 25 4 4 4 62  
0 4 5 17 2 4 5 28 4 4 5 69  
0 5 0 9 2 5 0 17 4 5 0 41  
0 5 1 11 2 5 1 20 4 5 1 48  
0 5 2 13 2 5 2 23 4 5 2 56  
0 5 3 15 2 5 3 26 4 5 3 64  
0 5 4 17 2 5 4 29 4 5 4 72  
0 5 5 19 2 5 5 32 4 5 5 81  
陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN  
接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣  
 
 
1 0 0 2 3 0 0 8 5 0 0 23  
1 0 1 4 3 0 1 11 5 0 1 31  
1 0 2 6 3 0 2 13 5 0 2 43  
1 0 3 8 3 0 3 16 5 0 3 58  
1 0 4 10 3 0 4 20 5 0 4 76  
1 0 5 12 3 0 5 23 5 0 5 95  
1 1 0 4 3 1 0 11 5 1 0 33  
1 1 1 6 3 1 1 14 5 1 1 46  
1 1 2 8 3 1 2 17 5 1 2 63  
1 1 3 10 3 1 3 20 5 1 3 84  
1 1 4 12 3 1 4 23 5 1 4 110  
1 1 5 14 3 1 5 27 5 1 5 130  
1 2 0 6 3 2 0 14 5 2 0 49  
1 2 1 8 3 2 1 17 5 2 1 70  
1 2 2 10 3 2 2 20 5 2 2 94  
1 2 3 12 3 2 3 24 5 2 3 120  
1 2 4 15 3 2 4 27 5 2 4 150  
1 2 5 17 3 2 5 31 5 2 5 180  
1 3 0 8 3 3 0 17 5 3 0 79  
1 3 1 10 3 3 1 21 5 3 1 110  
1 3 2 12 3 3 2 24 5 3 2 140  
1 3 3 15 3 3 3 28 5 3 3 180  
1 3 4 17 3 3 4 32 5 3 4 210  
1 3 5 19 3 3 5 36 5 3 5 250  
1 4 0 11 3 4 0 21 5 4 0 130  
1 4 1 13 3 4 1 24 5 4 1 170  
1 4 2 15 3 4 2 28 5 4 2 220  
1 4 3 17 3 4 3 32 5 4 3 280  
1 4 4 19 3 4 4 36 5 4 4 350  
1 4 5 22 3 4 5 40 5 4 5 430  
1 5 0 13 3 5 0 25 5 5 0 240  
1 5 1 15 3 5 1 29 5 5 1 350  
1 5 2 17 3 5 2 32 5 5 2 540  
1 5 3 19 3 5 3 37 5 5 3 920  
1 5 4 22 3 5 4 41 5 5 4 1600  
1 5 5 24 3 5 5 45 5 5 5 >1600  
 
為貫徹《中華人民共和國環境?;しā?、《中華人民共和國水污染防治法》、《中華人民共和國海洋環境?;しā?、《中華人民共和國大氣污染防治法》、《中華人民共和國傳染病防治法》,加強對醫療機構污水、污水處理站廢氣、污泥排放的控制和管理,預防和控制傳染病的發生和流行,保障人體健康,維護良好的生態環境,制定本標準。
   本標準規定了醫療機構污水及污水處理站產生的廢氣和污泥的污染物控制項目及其排放限值、處理工藝與消毒要求、取樣與監測和標準的實施與監督等。
   本標準自實施之日起,代替GB8978-1996《污水綜合排放標準》中有關醫療機構水污染物排放標準部分,并取代GB18466-2001《醫療機構污水排放要求》。新、擴、改醫療機構自本標準實施之日起按本標準實施管理,現有醫療機構在2007年12月31日前達到本標準要求。
    本標準的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D、附錄E和附錄F為規范性附錄。
本標準為首次發布。
    本標準由國家環境?;ぷ芫摯萍急曜妓咎岢霾⒐榭?。
本標準委托北京市環境?;た蒲а芯吭漢橢泄膊≡し攬刂浦行鈉鴆?。
本標準由國家環境?;ぷ芫?005年07月27日批準。
本標準由國家環境?;ぷ芫指涸鸞饈?。


醫療機構水污染物排放標準

1范圍

本標準規定了醫療機構污水、污水處理站產生的廢氣、污泥的污染物控制項目及其排放和控制限值、處理工藝和消毒要求、取樣與監測和標準的實施與監督。
本標準適用于醫療機構污水、污水處理站產生污泥及廢氣排放的控制,醫療機構建設項目的環境影響評價、環境?;ど枋┥杓?、竣工驗收及驗收后的排放管理。當醫療機構的辦公區、非醫療生活區等污水與病區污水合流收集時,其綜合污水排放均執行本標準。建有分流污水收集系統的醫療機構,其非病區生活區污水排放執行GB8978的相關規定。

2規范性引用文件

下列標準和本標準表5、表6所列分析方法標準及規范所含條文在本標準中被引用即構成為本標準的條文,與本標準同效。當上述標準和規范被修訂時,應使用其最新版本。
GB8978  污水綜合排放標準
GB3838  地表水環境質量標準
GB3097  海水水質標準
GB16297  大氣污染物綜合排放標準
HJ/T55   大氣污染物無組織排放監測技術導則
HJ/T91   地表水和污水檢測技術規范

3術語和定義

   本標準采用下列定義。
3.1醫療機構 medical organization
指從事疾病診斷、治療活動的醫院、衛生院、療養院、門診部、診所、衛生急救站等。
3.2醫療機構污水 medical organization wastewater
指醫療機構門診、病房、手術室、各類檢驗室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平間等處排出的診療、生活及糞便污水。當醫療機構其他污水與上述污水混合排出時一律視為醫療機構污水。
3.3污泥 sludge
指醫療機構污水處理過程中產生的柵渣、沉淀污泥和化糞池污泥。
3.4廢氣 waste gas
指醫療機構污水處理過程中產生的有害氣體。

4技術內容

4.1污水排放要求

4.1.1傳染病和結核病醫療機構污水排放執行表1的規定。
4.1.2縣級及縣級以上或20張床位及以上的綜合醫療機構和其他醫療機構污水排放執行表2的規定。直接或間接排入地表水體和海域的污水執行排放標準,排入終端已建有正常運行城鎮二級污水處理廠的下水道的污水,執行預處理標準。
4.1.3縣級以下或20張床位以下的綜合醫療機構和其他所有醫療機構污水經消毒處理后方可排放。
4.1.4禁止向GB3838I、II類水域和III類水域的飲用水?;で陀斡廄?,GB3097一、二類海域直接排放醫療機構污水。
4.1.5帶傳染病房的綜合醫療機構,應將傳染病房污水與非傳染病房污水分開。傳染病房的污水、糞便經過消毒后方可與其他污水合并處理。
4.1.6采用含氯消毒劑進行消毒的醫療機構污水,若直接排入地表水體和海域,應進行脫氯處理,使總余氯小于0.5mg/L。
表1 傳染病、結核病醫療機構水污染物排放限值(日均值)
序號 控制項目 標準值
1 糞大腸菌群數(MPN/L) 100
2 腸道致病菌 不得檢出
3 腸道病毒 不得檢出
4 結核桿菌 不得檢出
5 PH 6-9
6 化學需氧量(COD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
60
60
7 生化需氧量(BOD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
8 懸浮物(SS)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
9 氨氮(mg/L) 15
10 動植物油(mg/L) 5
11 石油類(mg/L) 5
12 陰離子表面活性劑(mg/L) 5
13 色度(稀釋倍數) 30
14 揮發酚(mg/L) 0.5
15 總氰化物(mg/L) 0.5
16 總汞(mg/L) 0.05
17 總鎘(mg/L) 0.1
18 總鉻(mg/L) 1.5
19 六價鉻(mg/L) 0.5
20 總砷(mg/L) 0.5
21 總鉛(mg/L) 1.0
22 總銀(mg/L) 0.5
23 總A(Bq/L) 1
24 總B(Bq/L) 10
25 總余氯1)2(mg/L)
(直接排入水體的要求)
0.5
注:1)采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為: 消毒接觸池的接觸時間≥1.5h,
接觸池出口總余氯6.5-10 mg/L。
    2)采用其他消毒劑對總余氯不作要求。
 
表2 綜合醫療機構和其他醫療機構水污染物排放限值(日均值)
序號 控制項目 排放標準 預處理標準
1 糞大腸菌群數(MPN/L) 500 5000
2 腸道致病菌 不得檢出 -
3 腸道病毒 不得檢出 -
4 pH 6-9 6-9
5 化學需氧量(COD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
60
60
 
250
250
6 生化需氧量(BOD)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
 
100
100
7 懸浮物(SS)
濃度 (mg/L)
最高允許排放負荷(g/床位)
 
20
20
 
60
60
8 氨氮(mg/L) 15 -
9 動植物油(mg/L) 5 20
10 石油類(mg/L) 5 20
11 陰離子表面活性劑(mg/L) 5 10
12 色度(稀釋倍數) 30 -
13 揮發酚(mg/L) 0.5 1.0
14 總氰化物(mg/L) 0.5 0.5
15 總汞(mg/L) 0.05 0.05
16 總鎘(mg/L) 0.1 0.1
17 總鉻(mg/L) 1.5 1.5
18 六價鉻(mg/L) 0.5 0.5
19 總砷(mg/L) 0.5 0.5
20 總鉛(mg/L) 1.0 1.0
21 總銀(mg/L) 0.5 0.5
22 總A(Bq/L) 1 1
23 總B(Bq/L) 10 10
24 總余氯1)2)(mg/L) 0.5 -
注:1)采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為:
一級標準:消毒接觸池接觸時間≥1h,接觸池出口總余氯3-10 mg/L。
        二級標準:消毒接觸池接觸時間≥1h,接觸池出口總余氯2-8 mg/L。
     2)采用其他消毒劑對總余氯不作要求。

4.2廢氣排放要求

4.2.1污水處理站排出的廢氣應進行除臭除味處理,保證污水處理站周邊空氣中污染物達到表3要求。
4.2.2傳染病和結核病醫療機構應對污水處理站排出的廢氣進行消毒處理。
表3 污水處理站周邊大氣污染物最高允許濃度                                          
序號 控制項目 標準值
1 氨(mg/m3 1.0
2 硫化氫(mg/m3 0.03
3 臭氣濃度(無量綱) 10
4 氯氣(mg/m3 0.1
5 甲烷(指處理站內最高體積百分數 %) 1%

4.3污泥控制與處置

4.3.1柵渣、化糞池和污水處理站污泥屬危險廢物,應按危險廢物進行處理和處置。
4.3.2污泥清淘前應進行監測,達到表4要求。
表4 醫療機構污泥控制標準
醫療機構類別 糞大腸菌群數
(MPN/g)
腸道致病菌 腸道病毒 結核桿菌 蛔蟲卵死亡率(%)
傳染病醫療機構 ≤100 不得檢出 不得檢出 - >95
結核病醫療機構 ≤100 - - 不得檢出 >95
綜合醫療機構和其它醫療機構 ≤100 - - - >95

5處理工藝與消毒要求

5.1醫療機構病區和非病區的污水,傳染病區和非傳染病區的污水應分流,不得將固體傳染性廢物、各種化學廢液棄置和傾倒排入下水道。
5.2傳染病醫療機構和綜合醫療機構的傳染病房應設專用化糞池,收集經消毒處理后的糞便排泄物等傳染性廢物。
5.3化糞池應按最高日排水量設計,停留時間為24-36h。清掏周期為180-360d。
5.4醫療機構的各種特殊排水應單獨收集并進行處理后,再排入醫院污水處理系統。
5.4.1低放射性廢水應經衰變池處理。
5.4.2洗相室廢液應回收銀,并對廢液進行處理。
5.4.3口腔科含汞廢水應進行除汞處理。
5.4.4檢驗室廢水應根據使用化學品的性質單獨收集,單獨處理。
5.4.5含油廢水應設置隔油池處理。
5.5傳染病醫療機構和結核病醫療機構污水處理宜采用二級處理+消毒工藝或深度處理+消毒工藝。
5.6綜合醫療機構污水排放執行排放標準時,宜采用二級處理+消毒工藝或深度處理+消毒工藝;執行預處理標準時宜采用一級處理或一級強化處理+消毒工藝。
5.7消毒劑應根據技術經濟分析選用,通常使用的有:二氧化氯、次氯酸鈉、液氯、紫外線和臭氧等。采用含氯消毒劑時按表1、表2要求設計。
5.7.1采用紫外線消毒,污水懸浮物濃度應小于10 mg/L,照射劑量30-40mJ/cm2,照射接觸時間應大于10s或由試驗確定。
5.7.2采用臭氧消毒,污水懸浮物濃度應小于20 mg/L,臭氧用量應大于10mg/L,接觸時間應大于12min或由試驗確定。

6取樣與監測

6.1污水取樣與監測

6.1.1應按規定設置科室處理設施排出口和單位污水外排口,并設置排放口標志。
6.1.2表1第16-22項,表2第15-21項在科室處理設施排出口取樣,總A、總B在衰變池出口取樣監測。其它污染物的采樣點一律設在排污單位的外排口。
6.1.2醫療機構污水外排口處應設污水計量裝置,并宜設污水比例采樣器和在線監測設備。
6.1.3 監測頻率
6.1.3.1糞大腸菌群數每月監測不得少于1次。采用含氯消毒劑消毒時,接觸池出口總余氯每日監測不得少于2次(采用間歇式消毒處理的,每次排放前監測)。
6.1.3.2腸道致病菌主要監測沙門氏菌、志賀氏菌。沙門氏菌的監測,每季度不少于1次;志賀氏菌的監測,每年不少于2次。其他致病菌和腸道病毒按6.1.3.3規定進行監測。結核病醫療機構根據需要監測結核桿菌。
6.1.3.3收治了傳染病病人的醫院應加強對腸道致病菌和腸道病毒的監測。同時收治的感染上同一種腸道致病菌或腸道病毒的甲類傳染病病人數超過5人、或乙類傳染病病人數超過10人、或丙類傳染病病人數超過20人時,應及時監測該種傳染病病原體。
6.1.3.4理化指標監測頻率:pH 每日監測不少于2次,COD和SS每周監測1次,其他污染物每季度監測不少于1次。
6.1.3.5 采樣頻率:每4小時采樣1次,一日至少采樣3次,測定結果以日均值計。
6.1.4監督性監測按HJ/T91執行。
6.1.5監測分析方法按表5和附錄。
6.1.6污染物單位排放負荷計算見附錄F。
表5 水污染物監測分析方法
序號 控制項目 測  定  方  法 測定下限(mg/L) 方法來源
1 糞大腸菌群數 多管發酵法   附錄A
2 沙門氏菌     附錄B
3 志賀氏菌     附錄C
4 結核桿菌     附錄E
5 總余氯 N,N-二乙基-1,4-苯二胺分光光度法
N,N-二乙基-1,4-苯二胺滴定法
  GB11898
GB11897
6 化學需氧量(COD) 重鉻酸鹽法 30 GB11914
7 生化需氧量(BOD) 稀釋與接種法 2 GB7488
8 懸浮物(SS) 重量法   GB11901
9 氨氮 蒸餾和滴定法
比色法
0.2
0.05
GB7478 GB7479
10 動植物油 紅外光度法 0.1 GB/T16488
11 石油類 紅外光度法 0.1 GB/T16488
12 陰離子表面活性劑 亞甲藍分光光度法 0.05 GB7494
13 色 度 稀釋倍數法   GB11903
14 pH值 玻璃電極法   GB6920
15 總 汞 冷吸收分光光度法
雙硫腙分光光度法
0.0001
0.002
GB7468
GB7469
16 揮發酚 蒸餾后4-氨基安替比林分光光度法 0.002 GB7490
17 總氰化物 硝酸銀滴定法
異煙酸-吡唑啉酮比色法
吡啶-巴比妥酸比色法
0.25
0.004
0.002
GB7486
GB7486
GB7486
18 總 鎘 原子吸收分光光度法(螯合萃取法)
雙硫腙分光光度法
0.001
0.001
GB7475
GB7471
19 總 鉻 高錳酸鉀氧化-二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7466
20 六價鉻 二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7467
21 總 砷 二乙基二硫代氨基甲酸銀分光光度法 0.007 GB7485
22 總 鉛 原子吸收分光光度法(螯合萃取法)
雙硫腙分光光度法
0.01
0.01
GB7475
GB7470
23 總 銀 火焰原子吸收分光光度法
鎘試劑2B分光光度法
0.03
0.01
GB119079              GB11908
24 總A 厚源法 0.05Bq/L EJ/T1075
25 總B 蒸發法   EJ/T900

                                                                                                                                                             

6.2大氣取樣與監測

6.2.1污水處理站大氣監測點的布置方法與采樣方法按GB16297中附錄C和HJ/T55的有關規定執行。
6.2.2采樣頻率,每2h采樣一次,共采集4次,取其最大測定值。每季度監測一次。
6.2.3監測分析方法按表6。
表6 大氣污染物監測分析方法
序號 控制項目 測定方法 方法來源
1 次氯酸鈉-水楊酸分光光度法 GB/T14679
2 硫化氫 氣相色譜法 GB/T14678
3 臭氣濃度(無量綱) 三點比較式臭袋法 GB/T14675
4 氯氣 甲基橙分光光度法 HJ/T30
5 甲烷 氣相色譜法 CJ/3037

6.3污泥取樣與監測

6.3.1取樣方法,采用多點取樣,樣品應有代表性,樣品重量不小于1kg。清掏前監測。                                                                                                                                                                                                                                                                                                 
6.3.2監測分析方法見附錄A、附錄B、附錄C、附錄D和附錄E。

7標準的實施與監督

7.1本標準由縣級以上人民政府環境?;ば姓鞴懿棵鷗涸鵂嘍絞凳?。
7.2省、自治區、直轄市人民政府對執行本標準不能達到本地區環境功能要求時,可以根據總量控制要求和環境影響評價結果制定嚴于本標準的地方污染物排放標準。


附錄  A

(規范性附錄)
醫療機構污水和污泥中糞大腸菌群的檢驗方法
 
A1  儀器和設備
A1.1 高壓蒸汽滅菌器。
A1.2 干燥滅菌箱。
A1.3 培養箱:37℃。
A1.4 恒溫水浴箱。
A1.5 電爐。
A1.6 天平。
A1.7 滅菌平皿。
A1.8 滅菌刻度吸管。
A1.9 酒精燈
A2  培養基和試劑
A2.1 乳糖膽鹽培養液
A2.1.1成分
蛋白胨                         20g
豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         5g
乳糖                           5g
0.4%溴甲酚紫水溶液            2.5mL
蒸餾水                         1000mL
A2.1.2 制法
將蛋白胨、豬膽鹽及乳糖溶解于1000mL蒸餾水中,調整pH到7.4,加入指示劑,充分混勻,分裝于內有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。
A2.2 三倍濃度乳糖膽鹽培養液
A2.2.1成分
蛋白胨                         60g
豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         15g
乳糖                           15g
0.4%溴甲酚紫水溶液            7.5mL
蒸餾水                         1000mL
A2.2.2 制法
制法同附錄A2.1.2。
A2.3 伊紅美蘭培養基(EMB培養基)
A2.3.1 成分
蛋白胨                          10g
       乳糖                            10g
       磷酸氫二鉀                      2g   
       瓊脂                            20g
       2%伊紅水溶液                   20mL
       0.5%美藍水溶液                 13mL
       蒸餾水                          1000mL
A2.3.2 制法
將瓊脂加到900mL蒸餾水中,加熱溶解,然后加入磷酸氫二鉀和蛋白胨,混勻使溶解,再加入蒸餾水補足至1000mL,調整pH至7.2~7.4。趁熱用脫脂棉和砂布過濾,再加入乳糖,混勻,定量分裝于燒瓶內,115℃滅菌20min。作為儲備培養基貯存于冷暗處備用。
臨用時,加熱融化儲備培養基,待冷至60℃左右,根據燒瓶內培養基的容量,加入一定量的已滅菌的2%伊紅水溶液和0.5%美藍水溶液,充分搖勻(防止產生氣泡)。傾注平皿備用。
A2.4 乳糖蛋白胨培養液
A2.4.1成分
蛋白胨                         10g
牛肉膏                         3g
乳糖                           5g
氯化鈉                         5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液          1mL
蒸餾水                         1000mL
A2.4.2 制法
將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000mL蒸餾水中,調整pH到7.2~7.4,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混勻,分裝于內有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。
A2.5 革蘭氏染色液
A2.5.1 結晶紫染色液
結晶紫                         1g
95%乙醇溶液                   20mL
1%草酸銨水溶液                1000mL
將結晶紫溶于乙醇中,然后與草酸銨水溶液混合。
A2.5.2 革蘭氏碘液
碘                             1g
碘化鉀                         2g
蒸餾水                         300mL
將碘與碘化鉀混合,加入蒸餾水少許,充分搖勻,待完全溶解,再加入蒸餾水至300mL。
A2.5.3 脫色液
95%乙醇。
A2.5.4 沙黃復染液
沙黃                           1g
95%乙醇                       2g
蒸餾水                         90mL
將沙黃溶于95%乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。
A2.6 染色法
染色的基本步驟為:1)涂片:在載玻片上滴加一滴生理鹽水,用滅菌的接種環取菌落少許,與生理鹽水混勻,涂布成薄膜;2)干燥:在室溫中使自然干燥;3)固定:將涂片迅速通過火焰2~3次,以載玻片反面接觸皮膚,熱而不燙為度;4)染色:滴加結晶紫染色液,染色1min,水洗;5)媒染:滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗;6)脫色:滴加95%乙醇脫色,約30s,水洗;7)復染:滴加復染液,復染1min,水洗。
革蘭氏陽性菌染色后呈紫色,革蘭氏陰性菌染色后呈紅色。
注:亦可用1:10稀釋的石炭酸復紅染色液作復染劑,復染時間為10s。
A3  檢驗程序
A4  操作步驟
A4.1 樣品準備
A4.1.1 污水
污水樣品應至少取200mL,使用前應充分混勻。
根據預計的污水樣品中糞大腸菌群數確定污水樣品接種量。糞大腸菌群數量相對較少的接種量一般為10mL、1mL、0.1mL。糞大腸菌群數較多時接種量為1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。
接種量少于1mL時,水樣應制成稀釋樣品后供發酵試驗使用。接種量為0.1mL、0.01mL時,取稀釋比分別為1:10、1:100。其它接種量的稀釋比依此類推。
1:10稀釋樣品的制作方法為:吸取1mL水樣,注入到盛有9mL滅菌水的試管中,混勻,制成1:10稀釋樣品。因此,取1mL1:10稀釋樣品,等于取0.1mL污水樣品。其它稀釋比的稀釋樣品同法制作。
注1:若樣品為經過氯消毒的污水,應在采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。
A4.1.2 污泥
污泥樣品應至少取200g,使用前應充分混勻。
根據預計的污泥樣品中糞大腸菌群數量確定污泥樣品接種量。糞大腸菌群數量相對較少的污泥樣品接種量一般為0.1g、0.01g、0.001g。糞大腸菌群數量較多時接種量為0.01g、0.001g、0.0001g或0.001g、0.0001g、0.00001g等。
污泥樣品應制成稀釋樣品后供發酵試驗使用。接種量0.1g、0.01g、0.001g的稀釋樣品制作方法如下:取20g污泥樣品,加入到三角燒瓶中,加滅菌水使成200mL,混勻,制成1:10稀釋樣品。吸取1:10稀釋樣品1mL,注入到盛有9mL滅菌水的試管中,混勻,制成1:100稀釋樣品。按同法制成1:1000稀釋樣品。接種1mL1:10、1:100、1:1000稀釋樣品等于接種0.1g、0.01g、0.001g污泥樣品。
注1:若樣品為經過氯消毒的污泥,應在采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。
A4.2 發酵試驗
將樣品接種于裝有乳糖膽鹽培養液的試管(內有小倒管)中,44℃培養24h。樣品接種體積以及管內乳糖膽鹽培養液的濃度與體積根據以下條件確定:
樣品為污水時,取三個接種量、每個接種量的樣品分別接種于5個試管內,共需15個試管。試管內乳糖膽鹽培養液的濃度與體積應根據接種量確定。若接種量為10mL,吸取10mL樣品接種于裝有5mL三倍濃度乳糖膽鹽培養液的試管內;若接種量為1mL時,吸取1mL樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養液的試管內;若接種量少于1mL時,吸取1mL稀釋樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養液的試管內。
樣品為污泥時,取三個接種量、每個接種量的稀釋樣品分別接種于3個試管內,共需9個試管。9個試管中,各裝有10mL乳糖膽鹽培養液。各個試管接種稀釋樣品體積均為1mL。
A4.3 平板分離
大腸桿菌分解乳糖產酸時培養液變色、產氣時小倒管內出現氣泡。經24h培養后,將產酸的試管內培養液分別劃線接種于EMB培養基上。置于37℃培養箱中,培養18~24h。
A4.4 鑒定
挑選可疑糞大腸菌群菌落,進行革蘭氏染色和鏡檢??梢刪溆校?)深紫黑色,具有金屬光澤的菌落;2)紫黑色,不帶或略帶金屑光澤的菌落;3)淡紫紅色,中心色較深的菌落。
上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,則挑取上述典型菌落1~3個接種于盛有5mL乳糖蛋白胨培養液倒管和倒管的試管內,置于44℃培養箱中培養24h。產酸產氣試管為糞大腸菌群陽性管。
A5 計數
根據證實有糞大腸菌群存在的陽性管數,查表A1或A2可得100mL污水或1g污泥中糞大腸菌群MPN值。
由于表A1和表A2是按一定的三個10倍濃度差接種量設計的(污水接種量為10mL、1mL和0.1mL,污泥接種量為0.1g、0.01g和0.001g),當采用其他三個10倍濃度差接種量時,需要修正表內MPN值,具體方法如下:
表內所列污水(污泥)最大接種量增加10倍時表內MPN值相應降低10倍;污水(污泥)最大接種量減少10倍時表內MPN值相應增加10倍。如污水接種量改為1mL、0.1mL和0.01mL時,A1表內MPN值相應增加10倍。其它的三個10倍濃度差接種量的MPN值相應類推。
由于A1表內MPN值的單位為每100mL污水樣品中MPN值,而污水以1L為報告單位,因此需將查A1表得到的MPN值乘上10,換算成1L污水樣品中的MPN值。
 
表A1 污水中糞大腸菌群最可能數(MPN)檢索表
(污水樣品接種量為5份10mL水樣,5份1mL水樣和5份0.1mL水樣)
陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN  
接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣  
0 0 0 0 2 0 0 5 4 0 0 13  
0 0 1 2 2 0 1 7 4 0 1 17  
0 0 2 4 2 0 2 9 4 0 2 21  
0 0 3 5 2 0 3 12 4 0 3 25  
0 0 4 7 2 0 4 14 4 0 4 30  
0 0 5 9 2 0 5 16 4 0 5 36  
0 1 0 2 2 1 0 7 4 1 0 17  
0 1 1 4 2 1 1 9 4 1 1 21  
0 1 2 6 2 1 2 12 4 1 2 26  
0 1 3 7 2 1 3 14 1 1 3 31  
0 1 4 9 2 1 4 17 4 1 4 36  
0 1 5 11 2 1 5 19 4 1 5 42  
0 2 0 4 2 2 0 9 4 2 0 22  
0 2 1 6 2 2 1 12 4 2 1 26  
0 2 2 7 2 2 2 14 4 2 2 32  
0 2 3 9 2 2 3 17 4 2 3 38  
0 2 4 11 2 2 4 19 4 2 4 44  
0 2 5 13 2 2 5 22 4 2 5 50  
0 3 0 6 2 3 0 12 4 3 0 27  
0 3 1 7 2 3 1 14 4 3 1 33  
0 3 2 9 2 3 2 17 4 3 2 39  
0 3 3 11 2 3 3 20 4 3 3 45  
0 3 4 13 2 3 4 22 4 3 4 52  
0 3 5 15 2 3 5 25 4 3 5 59  
0 4 0 8 2 4 0 15 4 4 0 34  
0 4 1 9 2 4 1 17 4 4 1 40  
0 4 2 11 2 4 2 20 4 4 2 47  
0 4 3 13 2 4 3 23 4 4 3 54  
0 4 4 15 2 4 4 25 4 4 4 62  
0 4 5 17 2 4 5 28 4 4 5 69  
0 5 0 9 2 5 0 17 4 5 0 41  
0 5 1 11 2 5 1 20 4 5 1 48  
0 5 2 13 2 5 2 23 4 5 2 56  
0 5 3 15 2 5 3 26 4 5 3 64  
0 5 4 17 2 5 4 29 4 5 4 72  
0 5 5 19 2 5 5 32 4 5 5 81  
陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN 陽性管數 每100mL水樣中MPN  
接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣 接種100mL水樣 接種10mL水樣 接種0.1mL水樣  
 
 
1 0 0 2 3 0 0 8 5 0 0 23  
1 0 1 4 3 0 1 11 5 0 1 31  
1 0 2 6 3 0 2 13 5 0 2 43  
1 0 3 8 3 0 3 16 5 0 3 58  
1 0 4 10 3 0 4 20 5 0 4 76  
1 0 5 12 3 0 5 23 5 0 5 95  
1 1 0 4 3 1 0 11 5 1 0 33  
1 1 1 6 3 1 1 14 5 1 1 46  
1 1 2 8 3 1 2 17 5 1 2 63  
1 1 3 10 3 1 3 20 5 1 3 84  
1 1 4 12 3 1 4 23 5 1 4 110  
1 1 5 14 3 1 5 27 5 1 5 130  
1 2 0 6 3 2 0 14 5 2 0 49  
1 2 1 8 3 2 1 17 5 2 1 70  
1 2 2 10 3 2 2 20 5 2 2 94  
1 2 3 12 3 2 3 24 5 2 3 120  
1 2 4 15 3 2 4 27 5 2 4 150  
1 2 5 17 3 2 5 31 5 2 5 180  
1 3 0 8 3 3 0 17 5 3 0 79  
1 3 1 10 3 3 1 21 5 3 1 110  
1 3 2 12 3 3 2 24 5 3 2 140  
1 3 3 15 3 3 3 28 5 3 3 180  
1 3 4 17 3 3 4 32 5 3 4 210  
1 3 5 19 3 3 5 36 5 3 5 250  
1 4 0 11 3 4 0 21 5 4 0 130  
1 4 1 13 3 4 1 24 5 4 1 170  
1 4 2 15 3 4 2 28 5 4 2 220  
1 4 3 17 3 4 3 32 5 4 3 280  
1 4 4 19 3 4 4 36 5 4 4 350  
1 4 5 22 3 4 5 40 5 4 5 430  
1 5 0 13 3 5 0 25 5 5 0 240  
1 5 1 15 3 5 1 29 5 5 1 350  
1 5 2 17 3 5 2 32 5 5 2 540  
1 5 3 19 3 5 3 37 5 5 3 920  
1 5 4 22 3 5 4 41 5 5 4 1600  
1 5 5 24 3 5 5 45 5 5 5 >1600  
 
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